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文章出處:常見問題 網(wǎng)站編輯: 冠石凈化 閱讀量: 發(fā)表時間:2020-09-02 16:28:08
植物組織培養(yǎng)是在嚴格的無菌條件下培養(yǎng)植物材料。要達到無菌操作和無菌培養(yǎng),就需要人為創(chuàng)造無菌的環(huán)境,使用無菌的器具,同時還需要人工控制的溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。無菌環(huán)境和無菌條件的創(chuàng)造需要一定的設備,實驗設備因工作的目的、具體的任務和所具有的條件而異。但大多數(shù)采用化學實驗室、微生物實驗室及醫(yī)療上的一些設備、器材和用具。
1. 實驗室基本組成
(a)無菌操作室
在植物組織培養(yǎng)中,無菌操作室(clean chamber)是進行植物材料的分離及培養(yǎng)體轉(zhuǎn)移的一個重要場所。由于植物組織培養(yǎng)需長時間的無菌操作,所以無菌條件的好壞對組織培養(yǎng)成功與否起重要作用。微生物的培養(yǎng)生長時間短,而植物組織培養(yǎng)短的一個月,長的達幾年。所以,防止細菌和霉菌混入是提高工作效率和影響生產(chǎn)成本的關鍵。
無菌操作室基本要求是:干凈無菌、密閉、光線好。一般安裝滑動門,使空氣不致流動,以防外界菌及塵埃的侵入;墻壁光滑平整,地面平坦無逢,便于清潔工作;室內(nèi)安裝紫外燈,以便滅菌,還要有照明裝置及燈座,以備臨時增加設備之用;室內(nèi)有超凈工作臺、移動式載物臺(醫(yī)用平板推車)、廣口瓶、試管、三角瓶、酒精燈、接種工具等。面積根據(jù)工作性質(zhì)可大可小,小的無菌操作室一般一間 5~7㎡即可。
接種室內(nèi)主要安放超凈工作臺,分單人使用和雙人同時連續(xù)作業(yè)使用兩種。超凈臺中準備接種用的器具,如尖頭小鑷子、彎頭小鑷子、接種針、解剖刀、手術剪刀等,以及酒精燈、儲存70%酒精浸泡的棉球的廣口瓶等。如果進行生長點或幼胚等細小結(jié)構(gòu)的分離與接種,還應當在超凈工作臺內(nèi)放置一臺小型的雙目解剖鏡,以便觀察、解剖和分離細小的外植體。
小型離心機主要用于分離和收集液體培養(yǎng)中的細胞、單花粉及原生質(zhì)體等,也可用來篩選處于不同發(fā)育階段的胚狀體。
無菌室外最好設置預備室作為緩沖間,以防工作人員進出時帶進雜菌??販毓庹张囵B(yǎng)箱可以安放在緩沖間內(nèi)。預備室與無菌室之間最好以玻璃相隔,便于觀察和參觀。在預備室可放置工作服、鞋、帽等,也需要裝自來水和紫外燈。
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