完整的組織培養(yǎng)室通常包括洗滌室、準(zhǔn)備室(化學(xué)實(shí)驗(yàn)室)、接種室(無菌操作室)、培養(yǎng)室、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室等部分??梢愿鶕?jù)實(shí)際需要和條件進(jìn)行設(shè)計(jì)。
組培室建設(shè)首要考慮的問題就是組培室需要哪些設(shè)備條件和需要什么樣的培養(yǎng)條件。對(duì)這些有了全面了解以后,我們便可以因地制宜地新建或利用現(xiàn)有房屋建設(shè)實(shí)驗(yàn)室。在設(shè)計(jì)組培室時(shí),一般情況應(yīng)按組培的流程來設(shè)計(jì),同時(shí)考慮人物分流順暢,空間合理利用。植物組織培養(yǎng)要求嚴(yán)格的無菌的條件,需要一定專業(yè)儀器設(shè)備、器材和用具,同時(shí)還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。
洗滌室完成玻璃器皿和其它儀器的清洗、干燥和貯存。室內(nèi)應(yīng)配備大型水槽,用于培養(yǎng)器皿的洗滌,好是內(nèi)襯白瓷磚的水泥槽。為防止碰壞玻璃器皿,可鋪橡膠板,上下水道要暢通。備有大型塑料筐,用于放置培養(yǎng)器皿??芍苯又糜跀R架上,以節(jié)約空間和便于運(yùn)輸工作。備有空干架,以空干涮凈的培養(yǎng)器皿。
1、天平
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室需要2-3臺(tái)不同精度的天平。感量0.001g的天平(分析天平)和感量0.0001g的天平(電子天平)用于稱量微量元素和一些較高精確度的實(shí)驗(yàn)用品。感量0.01g和0.1g的天平,用于大量元素母液配制和一些用量較大的藥品的稱量。
2、冰箱
各種維生素和激素類藥品以及培養(yǎng)基母液均需低溫報(bào)存,某些試驗(yàn)還需植物材料進(jìn)行低溫處理,一般普通冰箱即可。
3、酸度計(jì)
用于測(cè)定培養(yǎng)基及其它溶液的pH,一般要求可測(cè)定pH范圍1-14之間,精度0.01即可。
4、離心機(jī)
用于細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞分離,亦用于培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞器、核酸以及蛋白質(zhì)的分離提取。根據(jù)分離物質(zhì)不同配置不同類型的離心機(jī)。細(xì)胞、原生質(zhì)體等活細(xì)胞的分離用低速離心機(jī);核酸、蛋白質(zhì)分離用高速冷凍離心機(jī);規(guī)?;a(chǎn)次生產(chǎn)物,還需選擇大型離心分離系統(tǒng)。
5、加熱器
用于培養(yǎng)基的配制。研究性實(shí)驗(yàn)室一般選用帶磁力攪拌功能的加熱器,規(guī)?;笮蛯?shí)驗(yàn)室用大功率加熱和電動(dòng)攪拌系統(tǒng)。
6、其它
純水器、分裝設(shè)備
?。ǘ缇O(shè)備
維持相對(duì)得無菌環(huán)境是組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的基本要求。
1、高壓滅菌鍋
用于培養(yǎng)基、玻璃器皿以及其它可高溫滅菌用品的滅菌,根據(jù)規(guī)模大小有手提式、立式、臥式等不同規(guī)格。
2、干熱消毒柜
用于金屬工具如鑷子、剪刀、解剖刀,以及玻璃器皿的滅菌。一般選用200℃左右的普通或遠(yuǎn)紅外消毒柜。
3、過濾滅菌器
用于一些酶制劑、激素以及某些維生素等不能高壓滅菌試劑的滅菌,主要有真空抽濾式和注射器式。
4、紫外燈
方便經(jīng)濟(jì)的控制無菌環(huán)境的裝置,緩沖間、接種室和培養(yǎng)室必備。
?。ㄈo菌操作設(shè)備
1、接種箱
是使用較早的簡(jiǎn)單的無菌裝置,主體為玻璃箱罩、入口有袖罩,內(nèi)裝紫外燈和日光燈,使用時(shí)對(duì)無菌室要求較高。
2、凈工作臺(tái)
其操作臺(tái)面是半開放區(qū),具方便、操作舒適優(yōu)點(diǎn),通過過濾的空氣連續(xù)不斷吹出,大于0.03um直徑的微生物很難在工作臺(tái)的操作空間停留,保持了較好的無菌環(huán)境。由于過濾器吸附微生物,使用一段時(shí)間后過濾網(wǎng)堵塞,因此應(yīng)定期更換。
(四)培養(yǎng)設(shè)備
培養(yǎng)設(shè)備是指根據(jù)需要所選用的不同規(guī)格和控制精度的用于植物細(xì)胞、組織和器官培養(yǎng)的設(shè)施和設(shè)備。
1、培養(yǎng)架
目前所有植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室植株繁殖培養(yǎng)的通用設(shè)施。成本低、設(shè)計(jì)靈活、可充分利用培養(yǎng)空間,以操作方便、大限度利用培養(yǎng)空間為原則。一般有4-5層,層間間隔40-50cm,光照強(qiáng)度可根據(jù)培養(yǎng)植物性來確定,一般每架上配備2-4盞日光燈。
2、培養(yǎng)箱
細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等要求精確培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn),可用光照培養(yǎng)箱、培養(yǎng)箱、濕度控制培養(yǎng)箱等培養(yǎng)。
3、搖床
進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí),為改善通氣狀況,可用振蕩培養(yǎng)箱或搖床。
?。ㄎ澹┢渌O(shè)備
可安裝時(shí)間程序控制器、溫度控制系統(tǒng)或空調(diào)實(shí)體顯微鏡、倒置式生物顯微鏡及配套的攝影、錄像和圖像處理設(shè)備;電泳儀、萃取和層析設(shè)備、紫外分光光度計(jì)、液相色譜儀、氣相色譜儀、酶聯(lián)免疫測(cè)定系統(tǒng)。
三、培養(yǎng)容器與用具
培養(yǎng)容器指盛有培養(yǎng)基并提供培養(yǎng)物生長(zhǎng)空間的無菌裝置,培養(yǎng)用具指培養(yǎng)物接種封口所用的各種金屬或塑料制品,實(shí)驗(yàn)室必備。
?。ㄒ唬┡囵B(yǎng)容器
包括各種規(guī)格的培養(yǎng)皿、三角瓶、試管、培養(yǎng)瓶。玻璃容器,一般用無色并不產(chǎn)生顏色折射的硼硅酸鹽玻璃材質(zhì)。塑料容器材質(zhì)輕、不易破碎、制作方便,廣泛使用。一般為聚丙烯、聚碳酸酯材料的培養(yǎng)容器。