植物組織培養(yǎng)是以植物組織和細(xì)胞的離體無菌操作為基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)性學(xué)科,它需要在一定的實(shí)驗(yàn)條件和定的實(shí)驗(yàn)環(huán)境下完成一系列操作,以無菌條件為重要前提,模擬植物細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育需要的各種設(shè)備、設(shè)施、培養(yǎng)條件,本文介紹了植物組培實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案,零附贈(zèng)植物組培實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備供大家參考。
組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室在設(shè)計(jì)前期要因地制宜地利用現(xiàn)有房屋建設(shè)進(jìn)行改造或者新建,植物組織培養(yǎng)是在嚴(yán)格無菌的的條件下進(jìn)行的,在無菌環(huán)境就需要一定的設(shè)備、器材和用具,同時(shí)還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。關(guān)于組織培養(yǎng)前實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案,實(shí)驗(yàn)室技術(shù)為您詳細(xì)的介紹,如有實(shí)驗(yàn)室相關(guān)問題,也可咨詢實(shí)驗(yàn)室技術(shù)。
1.準(zhǔn)備室:
進(jìn)行一切與實(shí)驗(yàn)有關(guān)的準(zhǔn)備工作,完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養(yǎng)基配制與分裝、培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿的滅菌、培養(yǎng)材料的預(yù)處理等。
要求:好有25平方米左右。要求寬敞明亮、以便于放置多個(gè)實(shí)驗(yàn)臺(tái)和相關(guān)設(shè)備,方便多人同時(shí)工作;同時(shí)要求通風(fēng)條件好,便于氣體交換;實(shí)驗(yàn)室地面應(yīng)便于清潔,并應(yīng)進(jìn)行防滑處理。
設(shè)備:準(zhǔn)備室應(yīng)具備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、藥品柜、水池、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計(jì)及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器等。
2、洗滌滅菌室
完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。
要求:洗滌滅菌室根據(jù)工作量的大小決定其大小,一般面積控制在25平方米。在實(shí)驗(yàn)室的一側(cè)設(shè)置專用的洗滌水槽,用來清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)還應(yīng)配置2個(gè)水槽,用于清洗小型玻璃器皿,地面應(yīng)耐濕并 排水良好。
設(shè)備:水池、落水架、中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)、高壓滅菌鍋、聲波清洗器、干燥滅菌器等。
3、緩沖間
是進(jìn)入無菌室前的一個(gè)緩沖場(chǎng)地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進(jìn)入無菌室和培養(yǎng)室。 進(jìn)入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進(jìn)出時(shí)帶入接種室雜菌。
要求:緩沖間需5-10平方米,可建在準(zhǔn)備室外或無菌操作室外,應(yīng)保持清潔無菌;備有鞋架和衣帽掛鉤,并有清潔的實(shí)驗(yàn)用拖鞋、已滅菌過的工作服;墻頂用1-2盞紫外燈定時(shí)照射,對(duì)衣物進(jìn)行滅菌。 緩沖間好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。緩沖間的門應(yīng)該與接種室的門錯(cuò)開,兩個(gè)門也不要同時(shí)開啟,以保證無菌室不因開門和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。
設(shè)備:1-2盞紫外燈、水槽、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。
4、無菌操作室(接種室)
也叫接種室,主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進(jìn)行無菌操作的技術(shù)程序,是植物離體培養(yǎng)研究或生產(chǎn)中關(guān)鍵的一步。
要求:接種室宜小不宜大,一般10平方米,其規(guī)模根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要和環(huán)境控制的難易程度而定。要求封閉性好,干爽安靜,清潔明亮,能較長(zhǎng)時(shí)間保持無菌,因此不易設(shè)在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒;配置拉動(dòng)門,以減少開關(guān)門時(shí)的空氣擾動(dòng);為便于消毒處理,地面及內(nèi)墻壁都應(yīng)采用防水和耐腐蝕材料;為了保持清潔,無菌室應(yīng)防止空氣對(duì)流。接種室要求在適當(dāng)位置吊裝 1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。好安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對(duì)流。 一般新建實(shí)驗(yàn)室的無菌室在使用之前應(yīng)進(jìn)行滅菌處理,處理方法是甲醛和熏蒸,并需定期滅菌處理,還可用紫外線照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。
設(shè)備:紫外燈、空調(diào)、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實(shí)驗(yàn)臺(tái)、和擱架,還有凈工作臺(tái)和整套滅菌接種儀器、藥品等。
5、培養(yǎng)室
對(duì)接種到培養(yǎng)瓶等器皿中的植物離體材料進(jìn)行控制條件下的培養(yǎng),無論是研究性實(shí)驗(yàn)室還是生產(chǎn)性實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行培養(yǎng)的場(chǎng)所。要求:約需 20-30平方米左 右,培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設(shè)備而定,其設(shè)計(jì)以充分利用空間和節(jié)省能源為原則。基本要求是能夠控制光照和溫度,并保持相對(duì)的無菌環(huán)境,因此,培養(yǎng)室應(yīng)保持清潔和適度干燥;為滿足植物培養(yǎng)材料生長(zhǎng)對(duì)氣體的需要,還應(yīng)安裝排風(fēng)窗和換氣扇等培養(yǎng)室的換氣裝置;為節(jié)省能源和空間,應(yīng) 配置適宜的培養(yǎng)架,并安裝日光燈照明。
研究用實(shí)驗(yàn)室,通??筛鶕?jù)光照時(shí)間設(shè)置成長(zhǎng)日照、中日照、短日照培養(yǎng)室,也可以根據(jù)溫度設(shè)置成高溫和低溫培養(yǎng)室,每一個(gè)培養(yǎng)室的空間不宜過大,便于對(duì)條件的均勻控制。進(jìn)行精細(xì)培養(yǎng)類型如細(xì)胞培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng),可采用光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱代替培養(yǎng)室。
為了控制培養(yǎng)室的溫度和光照時(shí)間及其強(qiáng)度,培養(yǎng)室的房間不要窗戶,但應(yīng)當(dāng)留一個(gè)通氣窗,并安上排氣扇。室內(nèi)溫度由空調(diào)控制,光照由日光燈控制。天花板和內(nèi)墻好用塑料鋼板裝修,地面用水磨石或瓷磚鋪設(shè),一般要分兩間,一為光照培養(yǎng)室,一為暗培養(yǎng)室。培養(yǎng)室外應(yīng)有一預(yù)備間或走廊。
培養(yǎng)材料放在培養(yǎng)架上培養(yǎng)。培養(yǎng)架大多由金屬制成,一般設(shè)5層,低一層離地高約lOcm,其他每層間隔30cm左右,培養(yǎng)架即高 1.7m左右。培養(yǎng)架長(zhǎng)度都是根據(jù)日光燈的長(zhǎng)度而設(shè)計(jì),如采用40W日光燈,則長(zhǎng)I.3m,30W的長(zhǎng)lm,寬度一般為60cm。日光燈一般用40W,固 定在培養(yǎng)架的側(cè)面或擱板的下面,每層有兩支日光燈,距離在20cm,光照強(qiáng)度為2000-3000lx。
培養(yǎng)室重要的因子是溫度,一般保持在20—27℃左右,具備產(chǎn)熱裝置,并安裝窗式或立式空調(diào)機(jī)。由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度,好不同種類有不同的培養(yǎng)室。
室內(nèi)濕度也要求恒定,相對(duì)濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器??刂乒庹諘r(shí)間可安裝定時(shí)開關(guān)鐘,一般需要每天光照10-16h,也有的 需要連續(xù)照明。短日照植物需要短日照條件,長(zhǎng)日照植物需要長(zhǎng)日照條件?,F(xiàn)代組培實(shí)驗(yàn)室大多設(shè)計(jì)為采用天然太陽光照作為主要能源,這樣不但可以節(jié)省能源,而且組培苗接受太陽光生長(zhǎng)良好,馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補(bǔ)充。
設(shè)備:培養(yǎng)架(控溫控光控濕)、搖床、轉(zhuǎn)床、自動(dòng)控時(shí)器、紫外燈、光照培養(yǎng)箱或人工氣候箱、生化培養(yǎng)箱、邊臺(tái)實(shí)驗(yàn)臺(tái)用于拍攝培養(yǎng)物生長(zhǎng)狀況,除濕機(jī)、顯微鏡、溫濕度計(jì)、空調(diào)等。
?。ǘ┹o助實(shí)驗(yàn)室
1、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室
用于對(duì)培養(yǎng)物的觀察分析與培養(yǎng)物的計(jì)數(shù),對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究,由制片室和顯微觀察室組成。制片是獲取顯微觀察數(shù)據(jù)的基礎(chǔ),配備有切片機(jī)、磨刀機(jī)、溫箱及樣品處理和切片染色的設(shè)備。應(yīng)有通風(fēng)櫥和廢液處理設(shè)施。顯微觀察室主要是顯微鏡和圖像拍攝、處理設(shè)備。
要求:明亮、清潔、干燥、防止潮濕和灰塵污染。
設(shè)備:雙筒實(shí)體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。
2、生化分析實(shí)驗(yàn)室
培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室,隨時(shí)對(duì)培養(yǎng)物成分進(jìn)行取樣檢查。大型次生代謝物生產(chǎn),還需有效分離實(shí)驗(yàn)室。